【j9九游会登录入口首页讲堂 第十一期】ELISA检测高性能探讨
浏览次数：20 日期：2023-12-19 14:43:53
主题：ELISA检测高性能探讨
讲师：申艳丽 武汉j9九游会登录入口首页生物 高级技术工程师
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1960年，美国科学家Yalow和Berson首先应用放射免疫试验（Radioimmnuoassay, RIA）技术，检测血浆中内源性的胰岛素，解决了以前难以测定的微量生物活性物质的临床检测问题，也因此获得了1977年的诺贝尔生理学或医学奖。无可否认，RIA技术是免疫测定技术发展史上的里程碑，但由于试剂半衰期短、放射危害、对实验室特殊设备的要求以及昂贵的计数设备，逐步被非同位素标记物建立的免疫标记测定技术代替。
1971年瑞典学者Engvail和Perlmann，荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，即酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 。
ELISA，即酶联免疫吸附技术，是一种应用广泛的免疫检测方法。其基本原理是：以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
依据ELISA基本原理，其可以分为直接法、间接法、双抗夹心法、竞争法。针对不同的方法，都有其各自的适用性；而针对不同的研究指标，都有其相对适用型的ELISA。对于免疫检测常用方法，免疫组化（Immunohistochemistry, IHC）具有较强针对性，并可在组织和细胞中进行抗原的准确定位以及定性分析，一般不用于定量检测；虽然蛋白质印迹（Western Blot, WB）也可进行定性和定位(通过提取膜蛋白或核蛋白、胞浆蛋白分别检测其中抗原含量，进而间接反映它们的定位)，定量则可能更加准确，但其敏感性远远低于IHC。而ELISA与IHC、WB相比，定量最准确，灵敏度更高，是蛋白检测首选方法之一，尤其对于定量分析多个样本非常有用，所用试剂和样品量很少，结果精确。
ELISA作为一项成熟的检测技术，通常在96微孔板中进行，可用于检测血清、血浆、细胞培养上清液、细胞裂解液、唾液、组织裂解液和尿液等多种样本，通过抗原抗体的特异性反应以及显色反应进行高通量检测，其检测速度快、操作简单、成本低廉，在生物技术学术机构、生物基础研究实验室等多机构广泛应用。
