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抗体分离纯化的原理

日期:2023-07-04 16:11:06

    抗体的分离纯化原理主要依靠其特异性与抗原结合的亲和作用。以下是常见的抗体分离纯化方法及其原理:
 
    亲和层析法:利用抗体与特定抗原结合的亲和作用,将目标抗体选择性地吸附在具有相应配体的固定相上,然后通过洗脱将目标抗体从固定相上解离下来。这种方法适用于多种规模和形式的样品,可以选择性地纯化特定抗体。
 
    蛋白A/G/L亲和层析法:蛋白A、蛋白G和蛋白L是常用的抗体亲和层析材料。它们能够与抗体的Fc区域或轻链结合,在一定条件下选择性地吸附目标抗体,然后通过调整条件解离目标抗体进行纯化。
 
    离子交换层析法:利用离子交换固定相,根据抗体与固定相之间的电荷差异,通过调整洗脱条件(如盐浓度、pH值)使得抗体与固定相发生相互作用和解离,实现抗体的分离纯化。
 
    凝胶过滤层析法:利用凝胶的孔隙大小来分离不同分子量的蛋白质,可以将目标抗体从其他小分子杂质中分离出来,并保留在凝胶上。
 
    电泳法:通过电场作用,根据抗体的电荷和分子量的不同,使其在凝胶电泳过程中发生迁移,并进行分离纯化。
 
    这些方法可以根据实际需要和样品特性进行选择和组合使用,以达到对抗体的有效分离和纯化。