重组dna技术中常用的工具酶有哪些?
日期:2023-09-28 15:31:11
重组DNA技术是指利用分子生物学方法将外源DNA序列与目标DNA序列进行拼接、克隆和表达的一系列技术,其核心是DNA重组。在重组DNA技术中,常见的工具酶包括:
质粒限制酶:如EcoRI、BamHI、HindIII等,用于切割质粒和DNA片段。
DNA连接酶:如T4 DNA连接酶、Taq DNA连接酶等,用于将DNA片段连接成完整的DNA分子。
外切酶:如Alkaline Phosphatase、Shrimp Alkaline Phosphatase等,用于去除质粒内部的过量的单链末端,防止自身重连。
核酸合成酶:如Taq聚合酶、Pfu聚合酶等,用于扩增DNA片段。
T4DNA解旋酶:用于线性化闭环DNA,以便于取出DNA片段。
磷酸二酯酶:用于从phosphodiester链上去除2-5'磷酸单核苷酸(如T4 PNK),或者添加2-5'磷酸单核苷酸(如RADEY Plasmid labeling kit)
核酸电泳酶:如Agarase、Algarase等,用于提取目的DNA片段。
不同的实验目的和方法可能需要使用不同类型的酶或是酶的变种,因此在选择工具酶时应根据实际情况进行选择。
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