双特异性抗体制备流程
日期：2023-07-17 16:23:26
双特异性抗体（Bispecific Antibodies）是一种能够同时结合两个不同抗原的抗体分子，用于治疗疾病或进行研究。下面是一般的双特异性抗体制备流程：
设计：确定目标抗原及其结构和特性，并设计合适的双特异性抗体结构和连接方式。
基因工程：使用基因工程技术构建含有两个不同的抗体变量区（VH和VL）序列的基因组。这可以通过合成DNA片段、PCR扩增、引物设计等方法完成。
连接：将两个抗体变量区的基因组连接在一起，形成单个的双特异性抗体基因。
表达载体构建：将双特异性抗体基因插入适当的表达载体中，如质粒或病毒载体。该载体通常包括启动子、信号序列和选择标记等功能元素。
细胞培养与转染：将构建好的表达载体导入适当的细胞系统中，例如CHO细胞、HEK293细胞或其他真核细胞。通过细胞培养和转染，使表达载体进入细胞并开始抗体的合成。
蛋白表达与纯化：经过培养和表达后，收集细胞培养上清液。使用亲和层析、凝胶过滤等技术对双特异性抗体进行纯化和富集。
鉴定和验证：对纯化的双特异性抗体进行质量鉴定，如SDS-PAGE、Western blotting或ELISA等技术，以确定抗体的结构和功能。
功能验证：进行体外和/或体内实验，验证双特异性抗体的生物活性和效果。
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