单克隆抗体的制备过程及原理

日期：2023-07-24 17:20:40

单克隆抗体的制备过程主要包括以下步骤：免疫原制备、免疫动物免疫、细胞融合、筛选和克隆化、生产和纯化。

免疫原制备：首先，根据需要制备用于免疫的免疫原。免疫原可以是纯化的蛋白质、多肽、细胞表面分子等，也可以是化学合成的人工抗原。

免疫动物免疫：将免疫原注射到合适的免疫动物中，如小鼠、大鼠、兔子等。在一定时间内，多次给予免疫原刺激，以促使免疫动物产生特异性抗体。

细胞融合：从免疫动物中获取免疫细胞，通常是脾脏或骨髓细胞。将免疫细胞与肿瘤细胞（如骨髓瘤细胞）进行体外融合，生成杂交瘤细胞。

筛选和克隆化：利用选择性培养基和筛选方法，筛选出产生特异单克隆抗体的杂交瘤细胞。常用的筛选方法有ELISA、免疫组化、流式细胞术等。然后，将单个杂交瘤细胞分离克隆化，培养单克隆细胞株。

生产和纯化：从单克隆细胞株中大量培养和生产抗体。通常，采用培养基和培养条件优化，使单克隆细胞高效产生单克隆抗体。随后，通过离心、层析、凝胶电泳等技术，对产生的抗体进行纯化，去除杂质以获得纯净的单克隆抗体。

单克隆抗体制备的原理基于免疫系统的特性。通过免疫原的免疫刺激，免疫动物的B淋巴细胞可以产生多种抗体。细胞融合后形成的杂交瘤细胞具有多倍体性和无限增殖能力，同时保留了产生抗体的能力。通过筛选和克隆化，可以选择出产生特异单克隆抗体的杂交瘤细胞。最终，大量培养和纯化单克隆细胞产生的抗体，获得高纯度的特异性单克隆抗体用于研究、诊断或治疗等领域。