噬菌体展示技术筛选抗体的基本原理
日期:2023-10-11 16:39:53
噬菌体展示技术是利用噬菌体颗粒作为载体来展示外源多肽、蛋白或抗体等生物分子的方法,它被广泛应用于新药开发、蛋白质相互作用研究、肿瘤标志物筛选等领域。其中,基于噬菌体展示技术的抗体筛选被称为“噬菌体抗体库筛选技术”,其基本原理如下:
构建噬菌体抗体库:将目标抗原进行纯化或合成,并将其分别与噬菌体表面展示有抗体成分(抗体库)的噬菌体进行结合。这样可以构建出具有大量不同抗体成分(多肽抑或Fv抗体片段)的噬菌体抗体库。
筛选与抗原结合的噬菌体:将目标抗原涂覆在固定的载玻片上,随后将噬菌体抗体库加入到载玻片上,让其与抗原结合,以便检测哪些噬菌体能够与抗原结合。将未与抗原结合的噬菌体洗去后,固定于载玻片上与抗原结合的噬菌体便可进一步进行筛选和鉴定。
鉴定并提取所需抗体:对筛选出来的噬菌体进行克隆扩增,以获得其DNA序列信息,并用来表达单克隆抗体。而后可以将这些单克隆抗体进行进一步的鉴定,提取其中具有最佳特性的抗体,用于后续研究。
噬菌体展示技术是一种高效的抗体筛选技术,其利用载体噬菌体,在细胞水平上展示各类多肽、蛋白或抗体等生物分子,借此实现了高通量的抗体筛选,为抗体药物开发提供了新的途径。
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