为什么wb内参条带连在一起？

日期：2023-06-07 14:12:41

WB内参（Western Blotting Internal Reference）通常用来作为Western blotting实验的标准控制，以确保WB实验的可重复性和准确性。WB内参条带连在一起可能有以下几个原因：

1、过载

过载是指将样品或标准品上样过量导致条带过宽过浓，甚至出现多个条带，从而导致WB内参条带连在一起。如果过载严重，WB内参条带可能会与靶蛋白条带重叠，影响结果的准确性。

2、沉淀不洗涤干净

Western blotting实验中，溶液中可能存在着一些杂质或污染物，如果沉淀不洗涤干净，这些杂质会导致WB内参条带上出现多个细小的条带或污染带，从而影响实验结果。

3、磁珠去除不彻底

磁珠去除是Western blotting中的一个重要步骤，用于去除未结合的抗体和其他杂质。如果磁珠去除不彻底，未被去除的磁珠可能会在膜上形成细小的颗粒或线，从而导致WB内参条带上出现多个细小的条带或污染带，影响实验结果。

wb检测

Western blotting实验中，蛋白质样品的处理方式可能对WB内参条带产生影响。例如，在提取蛋白质时，用不同的缓冲液或方法可能会导致WB内参条带出现多个条带或污染带。此外，不同的蛋白质样品可能具有不同的特性，如电泳迁移速率、尺寸和电荷等，这些因素也可能会导致WB内参条带连在一起。

为了避免WB内参条带连在一起的情况，我们可以通过以下措施来减少这种情况的发生：

1、精准的取样量和洗涤步骤，以避免过载和污染。

2、使用好的抗体，充分去除未结合的抗体和其他杂质。

3、磁珠去除要彻底，避免磁珠残留。

4、在Western blotting实验前，对蛋白质样品进行充分的前处理和标准化。