无细胞蛋白质合成系统原料有哪些?
日期:2023-07-19 15:57:51
无细胞蛋白质合成系统(Cell-Free Protein Synthesis,CFPS)是一种在离体体系中合成蛋白质的方法,不需要完整的细胞。以下是常见的无细胞蛋白质合成系统中使用的原料:
DNA模板:包含目标蛋白质编码序列的DNA分子,作为合成蛋白质所需的指导信息。
原核细胞提取物:常用的是大肠杆菌(Escherichia coli)或其他细菌的细胞提取物。这些提取物包含了蛋白质合成所需的各种细胞机制,如核酸代谢、转录、翻译、修饰等。
能量源:通常使用ATP、GTP、CTP、UTP和氨基酸等能量源来支持蛋白质合成过程。
氨基酸混合物:包含所有20种天然氨基酸,用于构建目标蛋白质的多肽链。
辅因子和酶:用于调节蛋白质的折叠、修饰和降解等过程的辅助因子和酶,如氧化还原系统、蛋白酶、酶抑制剂等。
缓冲液和盐溶液:用于维持适宜的环境条件,调节pH值、离子浓度和渗透压等参数。
能量再生系统:如磷酸化系统、核糖酮糖酸循环等能提供ATP的再生系统,用于支持合成过程中的能量需求。
此外,根据具体实验要求,还可能添加其他辅助物质,如缓冲剂、蛋白质折叠辅助剂、表达调节因子等,以优化无细胞蛋白质合成系统的效率和产量。
不同的无细胞蛋白质合成系统可能使用略有不同的原料组分,具体的配方会根据实验需求和研究目的进行调整。
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