蛋白表达量的测定注意事项
日期：2023-09-03 16:48:06
蛋白表达量的测定是蛋白质相关实验中非常重要的一步，下面是蛋白表达量测定的注意事项：
采用合适的蛋白表达系统：选择适合表达目标蛋白的蛋白表达系统非常重要，常用的表达系统包括大肠杆菌、哺乳动物细胞、酵母等。在选择表达系统的时候需要考虑表达量、纯度、易于操作等方面因素。
平衡表达量和细胞生长速度：表达目标蛋白时，过高的表达量容易导致细胞毒性增加，从而抑制细胞生长，降低蛋白质产量。因此，平衡表达量和细胞生长速度是很重要的。
合适的收获时间：蛋白表达量通常与表达时间相关，必须选择合适的收获时间。收获时间过早，表达量可能不足；收获时间过晚，目标蛋白质可能被降解、稀释或错误折叠等。
正确的蛋白提取方法：蛋白质提取方法应根据表达系统和目标蛋白质特点选择，常用方法包括直接裂解法、溶解-重结晶法以及针对膜蛋白的特殊提取方法等。
准确测量蛋白质浓度：准确测量蛋白质浓度是蛋白表达量测定的前提。常用方法包括BCA、 Bradford、Lowry等。需要注意测定时需要减少潜在的干扰物质和误差。
使用合适的质控标准：使用合适的质控标准可以使蛋白表达量的测定更加准确。例如，采用外源蛋白作为内校准，或采用多个独立的蛋白样品进行数据校验。
在蛋白表达量测定过程中还需要遵守实验室的操作规范，保证实验的可重复性和结果的准确性。
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