蛋白质定量的三种方法及原理
日期：2023-09-14 15:20:00
蛋白质定量是生物学研究中的重要任务，以下是三种常用的蛋白质定量方法及其原理：
2、BCA法（双硫联苯胺法）：
3、Lowry法：
1、Bradford法：
原理：Bradford法是基于蛋白质和染料之间的相互作用原理。在酸性条件下，蛋白质与吸附染料（例如Coomassie Brilliant Blue G-250）形成复合物，导致染料溶液的吸光度变化。该吸光度变化与蛋白质浓度呈线性关系。
应用：Bradford法广泛应用于常规蛋白质测定，适用于大多数蛋白质样品。
2、BCA法（双硫联苯胺法）：
原理：BCA法也是一种基于染料与蛋白质之间的相互作用原理的方法。在碱性条件下，蛋白质中的蛋白质结合能力将还原剂（如四氯化钴或四氯化铜）还原为二价离子，并与BCA试剂中存在的碱式溴酮酸盐反应生成可见光吸收的紫红色产物。产物的吸光度与蛋白质浓度成正比。
应用：BCA法对于蛋白质浓度较低的样品敏感，广泛应用于常规蛋白质测定，适用于多种蛋白质样品。
3、Lowry法：
原理：Lowry法是一种经典的蛋白质定量方法。该方法利用蛋白质在酸性环境中与染料（如铜离子和碱式碳酸铜）形成络合物，并在碱性条件下发生还原反应，产生可见吸收光谱。该光谱与蛋白质浓度呈线性关系。
应用：Lowry法在蛋白质定量中具有较高的灵敏度和准确性，适用于大多数蛋白质样品。
不同蛋白质定量方法的选择应根据实验需求、样品类型和仪器设备等因素综合考虑。另外还有其他一些常用的蛋白质定量方法，如生物素-亲和法（biotin-streptavidin method）、免疫印记法（immunoassay）等，可以根据具体情况选择合适的方法进行蛋白质定量。
上一篇： 蛋白表达实验中加PBS沸水浴的目的
下一篇： 蛋白质纯度测定方法
