sec外泌体提取试剂盒步骤

日期：2023-05-19 11:31:32

SEC (Size Exclusion Chromatography) 是一种常用的外泌体分离方法，可以将不同大小的外泌体进行分离，从而提取纯净的外泌体。以下是一般SEC外泌体提取试剂盒步骤：

1、样品处理：首先应该选择一个合适的细胞培养基或体液来收集样品，离心去除细胞碎片、细胞核等杂质，然后将样品保存在-80℃的冰柜中。

2、试剂准备：将试剂盒中的缓冲液等试剂按照说明书的要求配制好。注意保证试剂的新鲜度和纯度。

3、样品稀释：将冰冻的样品缓缓化解，在适当的条件下进行均匀分散。

4、样品上清分离：将上述稀释后的样品采用离心管进行离心，去除细胞碎片和非细胞完整体，留下上清液。

5、上清液过筛：将上清液通过0.22μm或更小孔径的滤膜过滤，以去除残留的大颗粒物。

6、SEC柱装置：在SEC柱中填充固定相树脂，并预先平衡树脂至平衡缓冲液条件下。

7、样品加载：将经过过筛的样品通过装置好的SEC柱进行加载，注意保证样品不超过SEC柱承载能力。

8、冲洗收集：使用平衡缓冲液对SEC柱进行冲洗，收集出流液。

9、上样清洗液回收：收集每个分数管中的上样清洗液，并使用RNA提取试剂盒进行RNA提取。

外泌体提取