elisa试剂盒各试剂作用区别
日期：2023-09-25 15:35:47
ELISA（酶联免疫吸附试验）是常用的生物学实验技术，用于检测和定量分析特定抗原或抗体的存在。ELISA试剂盒通常包含以下主要试剂：
1、涂布抗原
涂布抗原是一种包含目标抗原的溶液或片段。它负责在固相载体上固定目标抗原，使其与待测样品中的特异性抗体发生结合反应。
2、样品/标准
样品是待测的生物样本，可以是血清、血浆、组织提取物等。而标准则是已知浓度的目标抗原。
它们用于检测和量化目标抗原的存在和水平，与涂布抗原进行结合反应。
3、初级抗体
初级抗体是针对目标抗原的特异性抗体。它与样品中的目标抗原结合形成免疫复合物。
初级抗体通常与辅助设备（如酶、荧光标记或生物素）结合，以便在后续步骤中检测和定量。
4、洗涤缓冲液
洗涤缓冲液用于清洗试验孔，去除未结合的物质（如非特异性结合物）。
它可以包含适当的盐、洗涤剂和缓冲剂，以保持试验环境的稳定。
5、二级抗体
二级抗体是与初级抗体结合并携带标记（如酶、荧光或生物素）的抗体。
它与初级抗体结合免疫复合物，进一步增强信号产生和检测效果。
6、底物
底物是一种通过酶促反应触发可见信号的化学物质。常见的底物包括酶标记的底物（如TMB、ABTS等）和荧光底物。
底物与酶结合时会发生颜色变化或荧光发射，用于定量或检测信号。
7、停止液
停止液是一种改变反应pH值的溶液，用于停止底物反应，阻止进一步的信号产生。
它通常加入后会使颜色或荧光信号停止变化，并稳定所测得的信号。
ELISA试剂盒中的每个试剂在特定步骤中起到关键作用，用于实现抗原-抗体反应、清洗、信号生成和停止等过程，最终得到可靠的结果。具体的试剂和使用方法可能会因供应商和实验目的而有所不同，因此在进行实验时应仔细阅读和遵循试剂盒说明书的操作指南。
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